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Lonza LT07-710 MycoAlert™ PLUS 支原体检测试剂盒使用指南

导读

由干细胞搜丨干细胞搜网编辑： MycoAlert™ PLUS Assay是一种精选生物化学检测方法，用于检测细胞培养过程中的支原体污染问题。支原体是一种能够自我复制的最小的原核微生物，和其他细菌不同的是它们没有细胞壁，所以细胞形态不固定，可以有多种变化，可以在培养基上形成极小的菌落。支原体是寄生生物，但同时也具有腐生功能。细胞培养过程中的污染支原体会使细胞生长变慢，影响细胞活性变化。

产品名称：MycoAlert™ PLUS 支原体检测试剂盒

产品货号： LT07-710

 

 

产品介绍：
MycoAlert™ PLUS Assay是一种精选生物化学检测方法，用于检测细胞培养过程中的支原体污染问题。支原体是一种能够自我复制的最小的原核微生物，和其他细菌不同的是它们没有细胞壁，所以细胞形态不固定，可以有多种变化，可以在培养基上形成极小的菌落。支原体是寄生生物，但同时也具有腐生功能。细胞培养过程中的污染支原体会使细胞生长变慢，影响细胞活性变化。新一代MycoAlert™ PLUS Assay可以检测出所有6种支原体属，多达180种支原体。与MycoAlert™支原体检测试剂盒相比有更高的灵敏度和准确性。操作简单快速，只需两步移液操作，20分钟内就可得出结果。适合用于检测的样品包括细胞上清液、未启用培养基、10%-20% FCS或FBS、L-谷氨酰胺、青霉素-链霉素混合物、中性胰蛋白酶、庆大霉素/两性霉素B等。

 

检测原理

检测样品中的活性支原体裂解后，释放出的酶与MycoAlert™ PLUS Substrate反应，催化ADP转化为ATP。加入MycoAlert™ PLUS　Reagent试剂后在荧光素酶作用下ATP产生光信号(ATP+ Luciferin + O2 →Oxyluciferin + AMP + PPi + CO2 + LIGHT)。光信号可用光度计读出，根据第二次读数(Read B)与次读数(Read A)比率可是确定是否存在支原体污染。Read B/Read A比率<1, 支原体阴性，无支原体；1-1.2，不确定是否存在支原体，需重新检测；>1.2，支原体阳性，存在支原体污染。

 

产品优点：
» 生物发光技术，无需DNA提取物
» 样品检测只需两步移液操作，结果分析简单
» 可以和低灵敏性的板光度计或多功能读数器配用
» 可用于检测未启用培养基，培养基补充物或水溶液
» 快速方便，标准程序20分钟就可出结果
» 通用性强，可检测所有常见的支原体污染(不含脲原体属)

 

组成成份：
• MycoAlert™ PLUS 试剂（冻干） 1 x 10 ml (LT27-286)
• MycoAlert™ PLUS 底物（冻干） 1 x 10 ml (LT27-289)
• MycoAlert™ PLUS 检测缓冲液 　1 x 20 ml (LT27-292)

 

 

 

支原体检测试剂盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit) 定义：支原体（mycoplasma），又称霉形体，没有细胞壁的原核生物，为目前发现的最小的原核生物。支原体细胞中*可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。它对许多抗生素具有抗性，如类胸膜肺炎微生物。

一.支原体污染成为细胞培养的重大隐患: 

1．研究表明，世界范围内超过15%的培养细胞都有支原体污染。

2．支原体污染会对细胞造成多方面的影响，包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、以及细胞存活等多方面的改变。

3．支原体污染会影响实验结果的稳定性、可靠性和准确性。

4．支原体难以检测，同时也很难消除。支原体能轻易地通过标准滤膜，同时也能拮抗绝大多数的抗生素，给细胞培养造成巨大损失。

二.常规检测才能有效避免细胞支原体污染:

1．常规性的进行支原体检测是保证细胞培养中不受到支原体污染影响的*途径。

2．传统的支原体检测方法需要在特殊的选择性培养基作用下对样品进行培养，时间往往达数周，费时，费力并且无法获得足够的灵敏度和特异性。

三、检测原理

美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性，进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作，能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解，然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应，将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一个比率，该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在，第二次读数相对于读数就没有增加；如果酶与底物进行特异性反应，就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到，其公式如下：Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT这个反应的发生是在室温(18°C～22°C)进行的，也是荧光素酶反应的*温度。在支原体检测试剂盒的检测原理中，*通过分光光度计读数，由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系，因此可检测支原体的污染问题。

Lonza支原体检测试剂盒的产品特征Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是专门检测细胞培养过程中是否被支原体污染的经典试剂盒，它包含检测所用到的各种试剂和产品操作手册。该支原体检测试剂盒具有操作简单、快速高效、结果稳定可靠、灵敏度极高等优点，让您在支原体检测时轻松容易，并确保您的培养洁净无污染。

四.推荐Lonza（原Cambrex）公司 MycoAlert 支原体检测试剂盒:采用发光检测，更能快速反映细胞培养中的支原体污染。避免支原体造成的损害，省力。

1．快速–20分钟就可以得到结果。

2．敏感度–可检测极少量的支原体。

3．简易–仅混合2种试剂和您的样品，将2种读数放到照度计上就可以得到确切结果。

4．完整–试剂盒包括检测用所需要的全部试剂！

 

订购信息：

  货号                             描述

• LT07-701 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 10Tests
• LT07-703 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 30Tests
• LT07-705 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 50Tests
• LT07-710 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 100Tests
• LT07-518 MycoAlert™ Assay Control Sets, 10Tests
• LT27-292 MycoAlert™ Assay Buffer, 20ml

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