内毒素,又名脂多糖。顾名思义,就是多糖链上带了几个酯链。内毒素存在于革兰氏阴性菌,由于细菌的广泛分布,受到内毒素污染的物品比比皆是。但是,内毒素一般只有在进入体液(包括血液)中时才会诱发免疫反应甚至发烧。所以,日用品中的内毒素可以说是对人体毫无影响,但医疗用品中的内毒素就十分危险了。因此,医疗用品的生产环节中都会尽量避免内毒素的引入,对于无法避免的,也会采用多种方法去除。在质控环节,仍然需要对产品进行抽样检测,但是内毒素的含量极小,每毫升多则几纳克级别,少则几皮克,所以检验的精度就至关重要。今天小编就来带大家了解一下内毒素检测的实验原理:
内毒素检测的方法分类:
1.凝胶法
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素的方法。在本检查法规定的条件下,使鲎试剂产生凝集的内毒素浓度即为鲎试剂的标示灵敏度,用EU/ml表示。
2.光度测定法
光度测定法分为浊度法和显色基质法。
浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法是依据反映混合物中的内毒素浓度和其在孵育终止时的浊度(吸光度和透光率)之间存在着量化关系来测定内毒素含量的方法。动态浊度法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度的方法。
显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法。终点显色法是依据反应混合物中内毒素浓度和其在孵育终止时释放出的有色团的量之间存在着量化关系来测定内毒素含量的方法。动态显色法是检测反应混合物的色度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测色度增长速度的方法。
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