自然杀伤细胞（NK cell, Natural killer cell）是一种细胞质中具有大颗粒的细 胞，也称NK细胞，由骨髓细胞发育而成。因为其非专一性的细胞毒杀作用而被命名。NK细胞主要分布于外周血中，占外周血单核细胞（PBMC）的5%～10%，淋巴结和骨髓中也存在NK细胞，水平较外周血低，但它可以消灭许多种病源体及多种肿瘤细胞。自然杀伤细胞会直接和陌生细胞接触，并以细胞膜 破裂之方式杀死此细胞，可利用分泌穿孔素及肿瘤坏死因子，摧毁目标细胞。目前研究认为NK细胞特异性表达CD56，而缺乏T细胞抗原CD3。一般认为在PBMC中分选到CD3- / CD56+的细胞即为NK细胞。

    NK细胞属于粒状淋巴细胞，是先天性免疫系统的重要组成部分，也是机体抗御感染和防止细胞恶性转化的重要免疫调节细胞。它对靶细胞杀伤时既不需特异性抗体参加，也不需抗原预先致敏。却能立即发挥非特异性杀伤靶细胞的作用，尤其是对多种肿瘤细胞有迅速杀伤和溶解作用。因此，NK细胞对癌症的监视作用和抵抗功能已越来越受到重视。

    NK细胞可通过多种途径被活化，包括细胞膜表面的CD2、CD3分子和多种细胞因子。

    1. 通过CD3分子的ζ链

    NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3ζ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。

    2. 通过CD2分子

    CD2与CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK细胞，CD3 ζ链发生酪氨酸磷酸化。

    3. 自然杀伤细胞刺激因子

    自然杀伤细胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor, NKSF)对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin, LR) 对NK细胞的活化和分化有正调节作用， 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。

NK细胞的功能

    1. 自然杀伤活性，NK细胞的杀伤活性无MHC限制，不依赖抗体，可以直接通过分泌释放穿孔素、颗粒酶、NK细胞毒性因子、TNF-α和TNF-β等对病毒感染的细胞、白血病细胞以及其他肿瘤细胞产生细胞毒活性，从而杀伤或者裂解靶细胞；

2. 抗病毒感染，NK可选择性地杀伤病毒感染的靶细胞。由辅佐细胞或NK细胞所产生的IFN可协同NK的抗病毒作用，而对正常细胞有保护作用。另一方面，病毒感染细胞表面的病毒抗原和其它表面分子使得其对NK细胞的杀伤作用变得更加敏感。此外，NK细胞在体外还可杀伤某些细菌、真菌、原虫等，可能与NK细胞释放某些杀伤介质有关。

3. NK细胞在免疫监视、杀伤突变的肿瘤细胞可能比T细胞具有更重要的作用。某些疾病如Chediak-Higashi或X性联淋巴增殖综合征患者，由于NK功能缺陷对恶性淋巴细胞增殖疾病特别易感。

4. 参与骨髓移植后移植物抗白血病效应：在体外NK细胞可杀伤某些淋巴样和髓样白血病细胞。骨髓移植后数周内，来自供体的NK细胞在PBL中占相当高的比例。此外，在体内NK细胞还可杀伤某些不成熟细胞如骨髓干细胞、胸腺细胞亚群等。

    治疗流程：

确定患者的入选标准→相关检查→血液采集→分离外周血单个核细胞→培养NK细胞→获得NK细胞→细胞回输→疗效评估→随访

培养方法：

1、治疗前检查血常规、凝血功能等常规项目；

2、用血液分离机采集病人外周血淋巴细胞或直接采集外周血；

3、在GMP实验室里，从采集的外周血中分离出单个核细胞，经多种细胞因子诱导、激活后进行增殖培养，此过程需要9-12天。

4、于培养的第9-13天开始分次回输NK细胞，每次回输过程大概1.5个小时。

5、一个疗程约14-16天。此后视情况进行下一疗程治疗。

    1、可直接识别、杀死癌细胞，抑制肿瘤的生长及扩散；

2、可直接改善和调节患者的免疫力和神经系统；

3、通过其分泌的因子抑制肿瘤附近新血管的增生，限制肿瘤生长；

4、分泌多种细胞因子，减少患者疼痛，提高生活品质；

5、NK细胞疗法可用于多种癌症，尤其对血液肿瘤，肺癌、淋巴癌、食道癌、乳癌、肝癌等血流旺盛且血管较密集的肿瘤有很好的疗效。

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