产品名称：康为世纪 金牌无内毒素质粒大提试剂 负压法

产品货号：CW2107M

英文名称：GoldVac EndoFree Plasmid Maxi Kit

产品规格：10 preps

产品介绍：

内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种快速、易大规模质粒制备的新方法。每次可处理100-300 ml菌液，获得多至2 mg转染级质粒DNA。使用真空装置可同时纯化多个样本，45分钟即可完成质粒提取，有效减少手动操作时间。特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤器，有效去除内毒素、基因组DNA、RNA、蛋白等杂质。本试剂盒所得质粒纯度高、提取量大，特别适用于细胞转染，同时也可用于DNA测序，PCR，体外转录，内切酶消化等实验。

产品组份：

产品特点：

1.提取速度快:利用真空装置，40分钟内快速纯化多个样本，有效减少手动操作时间

2.提取得率高:可从100-300 ml菌液，获得多至2 mg转染级质粒DNA。

3.产品品质高:提取的质粒DNA适用于大多数细胞株的高级转染实验。

配套试剂：

无水乙醇、异丙醇、真空泵、废液收集装置、真空纯化装置。

产品使用说明：

1．取100-300 ml过夜培养的菌液，加入离心管（自备）中，12,000×g离心2-3分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。

2．向留有菌体沉淀的离心管中加入12 ml Buffer P1（请先检查是否已加入RNase A），使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀

3．向离心管中加入12 ml Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。

4．向离心管中加入12 ml Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。将溶液全部倒入除内毒素过滤器中，慢慢推动推柄过滤，滤液收集在干净的50 ml离心管中。

5．向滤液中加入0.3倍滤液体积的异丙醇，上下颠倒混匀

6．正确连接负压装置，将连接管与DNA吸附柱连接好后插到负压装置的插口上

7．柱平衡：向DNA吸附柱中加入2 ml Buffer PS，开启并调节负压至-300~-700 mbar，吸去柱上溶液。

8．将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱中，吸去柱上溶液。

9．向DNA吸附柱中加入10 ml Buffer PW吸去柱上溶液。

10.保持负压抽吸10分钟，除去吸附膜内残留漂洗液，干燥吸附膜。若一次抽吸6个样品以上，可将负压抽吸时间适当延长。待吸附膜彻底干燥后，关闭负压开关。

11.将压力恢复至0 mbar时，取下吸附柱，将DNA吸附柱置于一个新的50 ml离心管中，向吸附膜的中间部位加入1-3 ml Endo-Free Buffer EB，室温放置2-5分钟，12,000×离心5分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。

保存条件：

室温 (15-30℃)

产品订购信息：

品牌             货号                   名称                                                规格

康为世纪    CW2107S       金牌超量无内毒素质粒大提试剂盒       2 preps

关于公司：

康为世纪生物科技股份有限公司是一家立足于生命科学领域，有自主知识产权的国家高新技术企业，主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产，为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。公司曾先后被评为国家高新技术企业、江苏省科技型中小企业、江苏省瞪羚企业、江苏省民营科技企业。公司建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台，构建成了公司完整的研发创新体系。

产品线主要包括分子诊断原料酶、核酸采集与保护剂、核酸提取试剂盒、分子诊断检测试剂等，打破了中国生物研究与产业对进口试剂的依赖。

华雅思创生物-买试剂，找华雅

上海华雅思创生物科技有限公司是一家为生命科学领域内的科学研究、细胞治疗和生物制药相关人员提供优质产品和服务的生物高科技公司，公司主办的干细胞搜网(w w w.stemcell.so)为中国干细胞领域大资源库，网站提供：干细胞治疗产品、细胞培养试剂耗材、脐带MSC间充质干细胞培养基、IPS细胞ES胚胎干细胞培养基、DC细胞淋巴细胞无血清培养基、R&D细胞因子等种类丰富的产品；涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等国际公司品牌和生产厂家。以“Yes Service”核心服务理念，紧紧围绕“Yes Service focus on Biology 越服务 专注生物”打造中华民族全新服务体系，我们与客户携手一起探索生命科学奥秘，解决人类健康问题，发展绿色环保生态，推动世界和谐持续发展。