当前位置:

人原代T细胞转染好选择:ProteanFect转染试剂盒

人原代T细胞在免疫学研究和细胞治疗中具有重要应用。ProteanFect作为一种高效的转染试剂,特别适用于人原代T细胞的基因递送,能够实现外源基因的高效表达。本文将详细介绍使用ProteanFect进行人原代T细胞转染的实验攻略。

原代T细胞的分离

从全血或血沉棕黄层的单核细胞(MNCs)或外周血单核细胞(PBMCs)开始,通过阴性选择或阳性选择分离得到T细胞亚群,包括CD3+ T细胞、CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。

原代T细胞的活化

使用CD3/CD28激活磁珠提供T细胞激活与扩增所需的刺激信号,显著提高T细胞的活化和扩增效率。

培养与传代

  • 建议每2天对T细胞进行传代,保持细胞密度在1×10^6/mL。
  • 在T细胞激活后2-10天进行转染,最佳转染时间为激活后4-7天。

转染操作

  • 使用Opti-MEM培养基(或无血清RPMI 1640/无血清DMEM培养基)进行转染。
  • 推荐使用ProteanFect Max转染试剂,它已被证明在人原代T细胞中实现高效和持久的基因表达。

实验结果

使用ProteanFect Max递送EGFP mRNA至人原代T细胞,可以在24小时后观察到强烈的EGFP表达。通过流式细胞术分析,转染后不同时间点(0.2天、1天、3天、6天、9天、12天)的EGFP阳性细胞比例均保持在高水平,显示出ProteanFect Max在人原代T细胞中实现持久基因表达的能力。
产品名称 货号 单位规格(试剂B)
ProteanFect转染试剂盒 PT0100 0.02 mL
ProteanFect转染试剂盒 PT0101 0.1 mL
ProteanFect转染试剂盒 PT0103 0.3 mL
ProteanFect转染试剂盒 PT0105 0.5 mL
ProteanFect转染试剂盒 PT0110 1.0 mL
ProteanFectMax转染试剂盒 PT0200 0.02 mL
ProteanFectMax转染试剂盒 PT0201 0.1 mL
ProteanFectMax转染试剂盒 PT0202 0.2 mL
ProteanFectMax转染试剂盒 PT0205 0.5 mL
ProteanFectMax转染试剂盒 PT0210 1.0 mL
企业介绍: 华雅思创生物®专注于提供CGT、分子诊断和先进医疗的生物试剂和医疗耗材产品,服务客户遍及细胞治疗、疫苗抗体、医疗诊断、脑科学、合成生物、长寿研究和医美保健等领域。”买试剂,找华雅”,华雅思创生物®凭借深厚的技术实力和严格的质量控制体系,已成为众多科研机构和生物制药企业的首选供应商。