品牌                            货号                    名称                                      规格

Rubicon Genomics R400584 ThruPLEX Tag-seq 6S（12）Kit  12Rxns

Rubicon Genomics R400585 ThruPLEX Tag-seq 48S Kit           48Rxns

Rubicon Genomics R400586 ThruPLEX Tag-seq 96D Kit           96Rxns

构建带有UMT（Unique Molecular Tags）的Illumina NGS文库

ThruPLEX® Tag-seq Kit

• 可信赖的实验结果。ThruPLEX Tag-seq 技术提供了多达1,600万个分子标签来纠正测序误差，

   提供可信的变异检测分析。

• 发现更多，成本更低。结合基于杂交技术的目标序列富集系统可分析数百个基因，同时分析突变和

   结构变异。

• 每次都可获得高质量文库。单管操作，2小时，3步操作流程。使用简便，可减少使用者操作误差和

   污染发生。

• 省时的生物信息学分析方案。采用Curio Genomics提供的云服务软件或开源软件可以快速获得

   研究结果。

• 珍贵样品分析成为可能。更低的DNA起始量，以往由于起始量太低而不能分析的样品也可以分析了。

   ThruPLEX Tag-seq可以1 ng至50 ng cfDNA或片段化的dsDNA起始，兼容多种样品类型。

■ 产品说明：

ThruPLEX Tag-seq采用带有特别分子标签（UMT）的ThruPLEX引物构建带有分子标记和样品检索引物的Illumina NGS文库。每个试剂盒包含超过1,600万个特别序列用于在扩增前标记每条DNA片段，可以在文库制备、目标富集和数据分析过程中追踪DNA片段，以检测低丰度等位基因或计数独立片段。采用ThruPLEX 技术设计及优化，可以1到50 ng DNA起始构建高多样性、高重复性文库。整个流程在单管或单孔中就可完成，只需3步，2小时，无需中间纯化步骤和样品转移，避免了操作误差和样品损失。ThruPLEX Tag-seq Kit 包含所需全部试剂，包括可以多重标记96个样品的检索引物。纯化和定量后，文库可以采用标准Illumina测序试剂和流程在Illumina NGS平台进行测序。

图1. 单管，三步操作流程。 ThruPLEX Tag-seq Kit以1-50 ng DNA起始构建检索引物文库只需3步：末端修复，接头连接和高保真文库扩增。无需纯化和样品转移步骤。简化的工作流程，在单管或单孔中2个小时即可完成，避免样品损失，增强了阳性识别。

图2. ThruPLEX DNA-seq Kit技术概要。ThruPLEX技术以片段化双链DNA或游离DNA起始，只需3步反应，简单高效。

图3. 减少背景，结果更可靠。以30 ng 1% Horizon cfDNA standard，采用 ThruPLEX Tag-seq构建文库。Agilent SureSelect富集目标区域，~5,000X覆盖度测序，采用Curio Genomics生物信息学平台分析数据。采用原始数据分析，EGFR 的突变（黄色点）会被背景误差遮盖（左图）。而在数据分析过程中使用UMT修正误差，突变更容易识别（右图）。

图4. 显著提高信噪比，发现更多。以30 ng（A）或10 ng Horizon cfDNA standard采用ThruPLEX Tag-seq构建文库，240 KB定制panel（NimbleGen SeqCapEZ）富集目标区域，HiSeq 2500 ~5,000X覆盖度测序。Curio Genomics生物信息学分析平台进行数据分析。

*数据来源于Takara Bio Inc.

■ 产品组成

• Template Preparation Buffer (Red）模板准备缓冲液（红色）
• Template Preparation Enzyme (Red）模板准备酶（红色）
• Library Synthesis Buffer (Yellow）文库合成缓冲液（黄色）
• Library Synthesis Enzyme (Yellow）文库合成酶（黄色）
• Library Amplification Buffer（Green）文库扩增缓冲液（绿色）
• Library Amplification Enzyme（Green）文库扩增酶（绿色）
• Nuclease-Free Water（Clear）无核酸酶水
• Indexing Reagent试剂（蓝色）

自备试剂：

热循环仪（推荐使用实时仪器）

离心分离机

PCR管或96孔PCR板和密封件

低吸附滤芯枪头

新鲜制备的80％（v / v）乙醇

Agencourt®XP核酸纯化磁珠（Beckman Coulter，目录号A63880）

■ 保存

－20℃