产品详细介绍：

种属: 小鼠（Mus musculus）

品系： 未知

组织来源: 胰腺（Pancreas）

疾病: 癌症（ Carcinoma）

年龄: 成年（Adult）

性别: 未知（Unknown）

细胞形态： 表皮细胞（Epithelial）

生长特性: 贴壁生长（Adherent）

培养瓶中细胞操作步骤

对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培 养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置 显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程 中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。

2. 对于贴壁培养的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5% CO 2的37℃恒温 培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶，请立即传代。

3. 对于悬浮培养的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 – 10 min，去除上清后，用5 mL 培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。

冻存细胞操作步骤

注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。

1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。

2.一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心200×g / 5 – 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。

4.用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。

5.将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。

贴壁细胞传代培养

1.吸取并弃掉培养瓶中培养基。

2.加入 0mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。

3.加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。

4.离心200xg/5min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬, 取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。

5.将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养

6.传代比例：建议 1:2 至 1:3。

7.培养基换液: 每隔 2至 3天。

266-6细胞ATCC CRL-2151小鼠胰腺腺泡癌细胞培养注意事项

1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3.用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4.静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度80%左右时正常传代。

5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6.建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用。

参考文献

References
Kruse F, et al. The cell-specific elastase I enhancer comprises two domains [published erratum appears in Mol. Cell. Biol. 8: 1862, 1988]. Mol. Cell. Biol. 8: 893-902, 1988. PubMed: 3352608

Swift GH, et al. Differential requirements for cell-specific elastase I enhancer domains in transfected cells and transgenic mice. Genes Dev. 3: 687-696, 1989. PubMed: 2744460

Ornitz DM, et al. Elastase I promoter directs expression of human growth hormone and SV40 T antigen genes to pancreatic acinar cells in transgenic mice. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 50: 399-409, 1985. PubMed: 3006998

Rose SD, et al. A single element of the elastase I enhancer is sufficient to direct transcription selectively to the pancreas and gut. Mol. Cell. Biol. 14: 2048-2057, 1994. PubMed: 8114736

Swift GH, et al. An element of the elastase I enhancer is an overlapping bipartite binding site activated by a heteromeric factor. J. Biol. Chem. 269: 12809-12815, 1994. PubMed: 8175694