RIPA Lysis Buffer
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产品名称:Beyotime RIPA裂解液(强)
产品货号:P0013B
英文名称:RIPA Lysis Buffer
产品规格:100ml
产品介绍:
碧云天生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
产品应用:
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品的组织裂解。
产品使用说明:
a.把组织切成细小的碎片。
b.融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
c.按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
d.用玻璃匀浆器匀浆,或使用碧云天生产的E6600 TissueMaster™手持式组织研磨仪研磨,直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨,研磨充分后加入裂解液进行裂解。
e.充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg冻存的小鼠肝脏组织用200微升本裂解液裂解后获得的上清,其蛋白浓度约为15-25mg/ml,不同状态的不同组织有所不同。
f.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器或研磨设备,缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
产品特点:
1.特殊的抗氧化剂有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA,使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使对脂质氧化的测定更加准确。
2.本试剂盒可以检测低达1μM的MDA,也可检测高达200μM的MDA在本试剂盒的检测范围内,可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
产品订购信息:
关于公司:
Beyotime创办于2001年。近20年来专注于自主研发和生产。2007年成立上海碧云天生物技术有限公司,为特新“小巨人”企业,并进一步入选第二批第一年建议支持的专精特新“小巨人”企业, 也是G60科创走廊一类重点扶持企业和上海市专精特新中小企业。江苏碧云天为江苏省高新技术企业,南通市双创优企。公司主要研发生产生物、医学研究用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备。
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上海华雅思创生物科技有限公司主营:生物技术产品的销售与技术服务、生物新技术新产品展示、生命科学领域项目合作服务、品牌策划与品牌形象广告宣传、生物医药行业人才咨询服务、生物医药行业管理咨询服务。以“传递科学价值,服务科学研究”为宗旨,经过近十年的努力,上海华雅思创生物科技有限公司在全中国代理的干细胞产品已经成功销往:上海市、北京市、重庆市、天津市、广东省的广州市、深圳市、珠海市、江西省的南昌市、四川省的成都市、绵阳、浙江省的杭州市、宁波、温州、江苏省的南京市、苏州、无锡、泰州、湖南省的长沙、陕西省的西安市、杨凌、甘肃省的兰州、宁夏的银川、新疆的乌鲁木齐、广西省的南宁市、山东省的济南、青岛、东北三省 辽宁省的沈阳市、大连市、吉林省的长春市、黑龙江省的哈尔滨市、海南省三亚等中国绝大部分省市和自治区。
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