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产品简介:
红荣微再SYBR Green qPCR Mix是一款含基因工程酶的qPCR试剂。该酶耐受体系中高浓度的SYBRGreen染料,可使反应体系中有更多的染料能与双链DNA进行结合,提高荧光信号值,可降低荧光信号达到阀值所需的循环数(Ct值),提高信噪比和灵敏度。
SYBR Green qPCR Mix特异性强,能有效减少非特异性扩增,数据结果更加可靠。产品能有效扩增复杂模板,如高AT或高GC的目的片段。抗抑制剂能力强。SYBR Green qPCR Mix是一种即用型试剂盒,含有除引物和模板以外的所有组分,用于qPCR中DNA的扩增和检测。该试剂是以2*的预混液形式提供,含有抗体调节的热启动酶,SYBR Green I荧光染料,MgCl, dNTPs和稳定 剂等。ROX参比染料单独提供,不包含在2x Mix中。
产品特点:
扩增特异性强,数据结果可靠;
反应效率高,Ct值提前;
信噪比高,灵敏度高;
高GC或高AT的片段扩增效果好;
耐受抑制剂能力强。
产品应用:
基因表达分析;
低拷贝数基因检测;
基因敲除验证;
基因表达验证;
RNA拷贝数检测(病毒及病菌等检测) ;
NGS文库的绝对定量。
产品性能:
(1)扩增特异性强,数据结果可靠
Fig1:
以人的cDNA为模板,使用引物ApoE及不同厂家试剂,扩增长度为322bp的片段, GC%=75.5%(高GC),分别得到红荣微再 SYBR Green qPCR Mix与各竞品的扩增和熔解曲线图;
Fig3:
以人的cDNA为模板,使用引物UBC及不同厂家试剂,扩增长度为123bp的片段, GC%=52.0%(GC 均衡),分别得到红荣微再 SYBR Green qPCR Mix与各竞品的扩增和熔解曲线图;
(2)扩增效率高,梯度稀释线性范围好,低拷贝检测灵敏度高
Fig4:
以KAPA Ion Torrent Library Quantification Kit 中浓度为8.3pM 的标准品作为S1,依次5倍稀释得到(S2-S10)为模板,红荣微再 SYBR Green qPCR Mix与竞品KP的扩增及熔解曲线图。
(3)荧光信号强,灵敏度高
Fig5:
使用市面上个品牌的qPCR试剂得到扩增曲线图,上图为去掉ROX后,各品牌的荧光信号值比较,竞品KP与StarLighter SYBR Green qPCR Mix的荧光信号强度最高。
(4)Ct值提早出现
Fig6:
以人DNA为模板,使用引物TR及不同厂家试剂,扩增长度为219bp的片段,GC%=64%;在产物经电泳验证为目的片段的前提下,扩增曲线去Rox校正后,StarLighter SYBR Green qPCR Mix CT值最小(灵敏度最高)。
(5)高GC或高AT的片段扩增效果好
Fig7:
以人的DNA为模板,使用引物F8-exon10及不同厂家试剂,扩增长度为399bp的片段,GC%=35.6%;从扩增效率上看, 红荣微再 SYBR Green qPCR Mix ,Eff=94.365%为最优,竞品TY3,Eff=121.91%,竞品KP,Eff=NA(最高浓度无扩增)。
储存与运输:
干冰储存条件下运输;产品到货后,将试剂盒各组分放置-20°C恒温冷冻箱中避光保存。正确储存及使用时,该试剂盒在有效期内能够保持性能。
质量控制:
红荣微再 SYBR Green qPCR Mix没有被任何DNA酶和RNA酶污染。以人基因组DNA作为模板进行功能测试,并以5个浓度梯度制作标准曲线时,反应效率为90-110%,R2> 0.99。
关于公司:
红荣微再作为RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子诊断专业供应商,以“传递科学价值,服务科学研究”为宗旨,公司致力于为生物领域的科研院所及高等院校基础实验室提供实验所需的试剂、为基因检测服务公司及IVD试剂盒生产厂家提供试剂原料,与客户携手为中国分子诊断的发展而前行。
红荣微再——助力分子诊断新未来
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