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Dojindo I1005 Indo 1-AM 钙指示剂、钙荧光探针

Indo 1-AM

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  • 注册品牌:
  • 生产厂家: 日本Dojindo公司
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  • 规格型号: 1 mg
  • 产品编号: HY-000692
  • 产品种类: 蓝盖瓶-试剂瓶

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产品英文名称:Indo 1-AM
产品中文名称:Indo 1-AM 钙指示剂、钙荧光探针

Indo 1-AM 产品简介


• 分 子 式: C47H51N3O22
• 分 子 量: 1009.91
• 外      观: 灰黄色固体
• 别      名: Indo 1-AM
• 纯      度: 97%以上(HPLC)
• 储存条件: -20℃
• 运输条件: 室温

Indo 1-AM 的产品特性

Indo 1是一种经过改进的适用于比率法的钙指示剂、钙荧光探针。两个用于Indo 1比率法检测的发射波长分别为410 nm和480 nm。Indo 1适合使用流式细胞仪通过比率法检测,这样可以测得双波长的荧光信号。有报道称Indo 1在进入细胞后的定位能力要强于Fura 2。Indo 1-AM是Indo 1 的乙酰甲酯衍生物,它通过培养能够进入活细胞。

Indo 1-AM 的操作说明(for Human T cells)
试剂:
2 mM的Indo 1-AM/DMSO
Pluronic F127
Hanks' balanced salt solution (HBSS)
HEPES buffer saline (10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM glucose, 0.1% BSA, pH 7.4)
操作:
1. 配制2mM的Indo 1-AM/DMSO溶液即:将1mg Indo 1-AM溶于495ulDMSO中(推荐现配现用)。
2.Pluronic F127先用DMSO配制成5%(W/V)的溶液,室温保存。使用时加入到上述Indo 1-AM/DMSO溶液至终浓度0.05%(W/V).
Pluronic F127可以防止Indo 1-AM在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
3. 用HBSS稀释Indo 1-AM溶液,制备4 µM的Indo 1-AM working solution。
4. 将Indo 1-AM working solution加入细胞,在37 ℃培养20分钟。
5. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续培养40分钟。
6. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次,然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮,制成1x105 cells/ml的溶液。
7. 37 ℃下培养10 分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
8. 观察528 nm (excitation: 490-500 nm)时的荧光。
*标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
 

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