Calcein-AM
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产品英文名称:Calcein-AM
产品中文名称:Calcein-AM 细胞染色剂
Calcein-AM 产品简介
分 子 式: C46H46N2O23
分 子 量: 994.86
外 观: 白色或浅黄色晶体
别 名: 钙黄绿素
纯 度: 90%以上(HPLC)
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Calcein-AM 产品描述
Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,由于它在Calcein的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate) 相比,Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低。Calcein不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。使用了Calcein的活性检测的实验结果是十分可信并且与标准的51Cr-释放法所得结果相一致的。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
Calcein-AM可与PI结合使用,分别对活细胞和死细胞染色,可用于同时对活细胞和死细胞进行荧光染色。
Calcein-AM 产品特性
Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在Calcein(钙黄绿素)的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein(钙黄绿素)留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低。Calcein(钙黄绿素)不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。另外,使用了Calcein(钙黄绿素)的活性检测的实验结果是十分可信并且与标准的51Cr-释放法所得结果相一致的。Calcein(钙黄绿素)的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
Calcein-AM和碘化丙啶(PI)溶液,它们分别可对活细胞和死细胞染色。Calcein-AM的乙酸甲基酯亲脂性很高,使其可透过细胞膜,通过活细胞内的酯酶作用,Calcein-AM能脱去AM基,产生的Calcein(钙黄绿素)能发出强绿色荧光,因此Calcein-AM仅对活细胞染色。另一方面,作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜。它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein(钙黄绿素)和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein-AM和碘化丙啶(PI)经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定Calcein-AM和PI的合适浓度。
Calcein-AM 使用注意事项
1、试剂容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量,开封前,请轻弹管壁几次,以保证粉末落入管底。
2、第一次使用时, 建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用,以保证实验效果。
3、溶解液DMSO需要保证新鲜无水,否则将会导致AM体水解,使荧光染料无法进入细胞,影响实验效果。
4、母液遇水极易分解,如果不能一次用完,建议分装保存,例如分装成5 μl/管,用封口膜封口,并用铝箔纸包裹,放在一个密闭性能好的塑料袋中,并放入一包干燥剂,在≤-20℃密封避光保存。
5、建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、染色试剂的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
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